关于精子的冷冻保存
经过3-7天禁欲后,用手淫方法取得精液。
梗阻性无精者可经附睾或睾丸穿刺取精进行检查和处理。
借精者精液来自精子库中的冷冻精液。
精液处理主要为达到者精液来自精子库中的冷冻精液。
精液处理主要为达到合符要求的活动精子密度,去除精浆及精液中的死精子、白细胞、抗体等成分,减少精液的粘稠性,促进精子获能,改善精子受精能力。
根据精液常规检查的结果,选用不同的处理方法,包括:(1)精子上游优化法:将精液标本按l:l加入培养液以下,置37℃、5%C02条件下孵育30分钟,收集上层液,200转离心10分钟,弃上清液,0.5m1培养液将沉淀悬浮做授精用;(2)Tyrode溶液法:选Tyrode溶液为培养液,其他同前;③Percoll精子洗涤浓缩法:适用于精子动力差者。
试管中由下至上依次置90%Percoll2ml,45%Percoll 2ml,精液lml,500转离心20分钟,吸出沉淀,lml培养液悬浮,200转离心10分钟,弃上清液,O.5ml培养液将沉淀悬浮做授精用。
通常采用上游法处理,筛选出质量好的精子与卵子结合。
精液加入冷冻保护剂后可以保存在液氮中。
(一)精子的收集 禁欲期(通常为 3~ 5d)后,用手淫方法将精子收集于 10~ 20mL 无菌的聚丙烯样品收集容器中。
要求禁欲期是为了更好地冷冻保存样品。
通常而言,这样的精子与收集前禁欲期较短及不规则的精子相比,冷冻保存后的特性更恒定且更完善。
射出的精液是液态的,但正常情况下立即凝结成胶状。
凝结后的精液通常在 30min内液化,此时就可测定其体积。
为了使精子获得最大的冷冻存活力,应在收集精液后 1min内开始对液化精子进行冷冻保存处理。
(二)体积的测量体积可用较准的加样器或带针头的 5mL 注射器来测量,有时也可根据收集精液前后采样瓶的重量之差来计算。
取 0.1~ 0.2mL 精液作精液分析(活动精子的百分数及其质量、精子密度等,参见本书有关章节),此外尚需取出一些精液,同时以用来做筛选某种性传染疾病的检测、进行某些检测以筛选导致性病的微生物如奈瑟淋球菌等(详见有关章节)。
(三)甘油化甘油作为冷冻保护剂,可以分步方式直接加入到未经处理的精液之中。
每次加入后混匀,时间间隔为 1min;或间接地作为扩张液或基液的组分,经稀释后逐步加入精液。
而在美国与加拿大,40上的著名精子库,仍单独使用甘油作为冷冻保护剂,而越来越多的新的精子库则使用扩张剂,尤其是含甘油的两性离子缓冲系统。
甘油化的条件不一定涉及温度的特殊条件(除了室温之外)和接触时间(除了加入甘油及混匀所需时间之外)。
(四)包装和存活力观察甘油化的精液可吸入塑料吸管(可用封口剂,加热,或用尼龙塞来密封)或放入玻璃安瓿(用火焰封口),也可放入塑料冷冻管(冷冻小瓶)后用螺口盖拧紧。
每份冷冻精液的体积通常是 0.4~ 0.8mL,这可作为人工授精的一个单位。
当然如果合适,人工授精也可能使用一个单位以上的精液,选择用于冷冻保存精子的容器是很重要的。
这种容器应是易于标记、操作、储存,同样也应具有很好的生物兼容性以及抗压性能。
高质量的聚丙烯吸管或小瓶看来最符合这些标准,而没有易碎及被洗涤剂污染等玻璃容器所具有的缺点。
放入液氮冷冻之前,除了要对被冷冻和储备的精子进行分装以外,还需准备一份质量控制检测样品。
对收集后未经处理的精液、用冷冻保护剂处理过的精液以及储存前、冻融后的精液均应观察其中的活动精子及其活动力。
通过观察能追踪冷冻保存各阶段的精子生存情况,并能确保了解冷冻精子的存活能力。
(五)冷冻吸管、安瓿中的精液冷冻保存时可分散或成组贮存,其位置保持垂直、水平或倾斜。
通常是放在液氮气雾中,有时也可放在机械(电子)冷冻柜的冷冻气中。
冷却和冷冻过程则可用人工以静态或逐步方式,也可用电脑控制的液氮供给系统来完成。
最常用的是操作者利用液氮储存容器中的气相以直接一次性或逐渐方式进行冷冻。
带有吸附液氮的石棉衬垫的生物干燥运送器,也能在气相中用于冷冻,然后在液相中转移到储存容器。
(六)储存经分装的样品,均应贮存在金属容器内的液氮之中,而这些容器则应放置在适当的液氮冷冻箱之内。
用以监视液氮水平面的装置[机械的和(或)电子的]是为了长期储存在高于液氮温度( -196℃ )的情况下防止丧失精子功能,监视水平面的常见机械(手工)方法是将一根带刻度的插杆垂直放入液氮底部后拔出,则在其上面就会形成一条霜线,以指示液氮水平面,至于各种复杂的局部和遥控电子警报系统现许多国家均已有市售。
另一方面,少数精子库只使用闪烁灯定期用肉眼检查,AATB 的组织库标准只要求一个有效的监测程序,以确保样品始终储存在液氮表面之下。
冷冻生物学家和有关研究人员,通过融解储存前样品,并进行检测,发现在冷冻刚开始期间精子活动力有某些丢失。
然而以后储存在液氮表面之下-196℃ 的冷冻精子,活动力没有进一步丢失,人们已经证实癌症患者治疗前精液中的精子冷冻生存活动力往往是差的(解冻后精子活动力百分数降低),尽管如此,这降低了的运动能力在长期储存期间并不进一步降低。
在所调查的 42家 AATB 成员的组织库中,只有 2 家报道了精液[由正常供精者及(或)治疗前患者提供]长期保存期间精子活动力丧失的例子。
另有报道只有 1 例冷冻保存 3 年后精子活动力丧失。
可以为人们所接受的观点是,贮存过程中精子活动力丧失系冷冻前没有准确测定所致或更可能是由于没有确保最佳储存条件所造成的。
(七)解冻将装有冷冻精子的包装盒暴露于空气或水中即可使冷冻精液恢复液态。
通常暴露在室温,但也可暴露在其他温度下,这要根据各精子库设计的方法学而定。
精子的存活时间和环境以及温度,酸碱度等方面都有很大的关系,精子在妇女体内能存活48小时以上,卵子排出后,在妇女体内能存活12-24 小时。
37℃环境中活动精子存活时间:4~8小时以上; 在阴道中活动精子存活时间:0.5天; 在宫颈中活动精子存活时间:2~8天; 在子宫和输卵管中活动精子存活时间:2~2.5天 你所述的情况(精液托人带回来),是会影响检测结果的,精液正常的液化时间是30分钟,即便是能保存下精液来,精液液化后,精子失去了影响来源,精子会自行死亡的,这样的话,检查结果会受到很大的影响,建议你的朋友最好是回国检查或者是去就近的医院进行检测,这样的话,才能有一个明确的结果,也能显示出患者的实际病情。
从生理看。
简单地说,正常的精液是由前列腺、精囊、尿道球腺、尿道道旁腺等附属性腺分泌的,呈灰白色或是蛋黄色蛋清样,有高度的粘稠性和特异的气味,PH值为7·2到7·8,精子用肉眼是看不到的,我们在射精的时候看到的是精液。
精子要在显微镜的帮助下才能看到,像笑蝌蚪一样的,拖着一条尾巴。
如何成功挽回变心的前男友?我是真的很爱他。
当你与前男友分手已经有一段时间了,你却发现你根本无法放得下这段感情。
但是挽回的大门不会因为你的无知行为而开启,其中的道理如同下棋,一步棋子走错了,会影响后面整个棋局的胜负。
对于挽回而言,需要你时刻保持谨慎,那么挽回男友该怎么做呢。
或者,建议你可以学习其他人的成功挽回经历,推荐给你一篇很好的文章:(王灵灵的成功挽回经历),是讲一个叫王灵灵的女孩子成功挽回异地恋男友的故事,可以白度一下挽回并不是苦苦哀求、抵死纠缠的方法就能让他回来的,反而会让他对你更加厌恶,挽回是一门学问,是一个循距渐进的结果,要挽回前男友,有哪些经验可以吸取助攻你挽回?冷冻期中怎么去降低自身需求感,把矛盾点降到最低?冷冻不是断联,很多人误以为冷冻就是断联,在分手初期见到男友如此反感和抗拒自己,所以错误的使用断联。
以为完全不联系对方,就能降低两人的矛盾点,并且在断联期间不做任何事情,任由自己的消极情绪泛滥,结果就真的再也无法联系上对方了。
冷冻其实是叫你不要再使用错误的挽回方法去挽回对方,比如苦苦哀求、死缠烂打、以死相逼等等,总之和对方表达你是如何不能没有他的,诸如这些都是高需求的挽回方法。
这样做只会让你自己的价值越来越低,让对方更加觉得和你分手是正确的。
所以,冷冻首先就是要减少对他的投入,学会降低自身对他的需求感。
默认对方分手的决定,并且认同对方提出的你的不足之处,让你们的矛盾点不会去到一个更高的点。
随着时间的推移,他就会慢慢的淡化自己对你反感度了。
如何进行自我反省并且针对性的进行改正?很多女生被分手,只会觉得自己很可怜,对方很渣,因为对方残忍的抛弃了自己。
她们大多数人都不能做到反省自身的问题,大多数恋爱中的女生都会觉得对方对自己好是应该的,在恋爱中已经习惯索取而不付出,觉得对方既然是男生就要无条件迁就女生。
在恋爱中不断加强自己对对方的需求感,如果对方没有达到自己的期望值她们就会失落,变得爱抱怨,久而久之男生就会觉得跟这个女生相处真的很累。
所以,当你被分手了,你更应该多去想想为何是你被分手了,而不是对方。
要学会从自己身上找问题,一段恋爱关系的结束,虽然双方都有不可避免的责任和问题,但是占绝大多数问题的肯定是被分手的一方。
为了挽回你必须要进行自我的反省,找到对方无法容忍你的地方,再进行针对性的改正。
冷冻期这个时间段,还能进行自我的改造,重新吸引对方。
一段恋爱关系的结束,不仅仅是由于你们之间一些无法解决的问题,更大的原因是对方已经不再对你有好感。
在问题暴露的过程中,也许你的很多处理方法越来越不被对方认同。
说白了,就是对方已经不再被你所吸引了,或者你满足不了他内心真正对爱情的需求,所以他才会选择离开。
所以,在冷冻期你更应该做的是进行自我的改造,对对方进行二次吸引。
我觉得何必呢?你现在越是挽留他,可能会让对方越是轻视你,觉得你对他是死缠不放,很有可能会更加厌恶你,不如好好来充实自己、学会好好爱自己。
你好首先你男友变心是为了什么,是因为这个很重要还有你们的相处模式,因为每个人的情况不一样具体的方法也不一样,感情问题是没有万能公式解决的,都是根据你自己和你男朋友的情况,而定,你可以把你们很详细的情况发给我,我帮你分析
天涯何处无芳草,何必单恋一枝花?弃你去者昨日之人不可留,爱你心者今日之人必回有。
爱情是两个人的共鸣,而不是单方面的苦苦哀求,那即使对方勉强和你相处了,势必没有琴瑟合奏的和谐,或许只是滥竽充数的敷衍而已。
实话,你接受现实吧 我不是站着说话不腰疼,女人如果想挽回 也许有戏。
但是如果男人说 不爱你了。
。
那就真是不爱你了,不是你用感动就能换回来的肯定是看上别人了。
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孩子,看开点吧。
你就算找他回来,也不会长久,也是迟早迟晚的变化。
男人就是这样的。
你再挽留的话,他更加不会回头的。
他会觉得你很烦,真的... 你现在应该振作起来,让他看见你没有他也活的很开心。
那时候如果他还爱你话,你们便有机会再和好。
如果他不爱你了,再做多余的挽留也是没有一点用的。
, 我记得张小娴说过一句话。
男人就是贱,你不爱他,你就最珍贵
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